分光光度計介紹
點擊：879 　添加時間：2021-9-14 9:46:13

    　　分光光度計，又稱光譜儀(spectrometer)，是將成（chéng）分複雜的（de）光，分解為光譜線的科學儀器。測（cè）量範圍一般包括波長範圍為（wéi）400~760 nm的可見（jiàn）光區和波長範圍為200～400 nm的紫外光區.不同的光源都有其特有的發射光譜（pǔ）,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源.

       鎢燈的發射光譜:鎢（wū）燈（dēng）光源所發出的（de）400～760nm波長的光譜光（guāng）通（tōng）過（guò）三棱鏡折射後,可（kě）得到由紅（hóng）橙,黃綠,藍靛,紫組成的連續色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源.

光度定義

       分光光度法是在特定波長處或一（yī）定波長範圍內光的吸收度，對該物質進行定性或定量分析。常（cháng）用的波長範圍為：(1)200～400nm的紫外（wài）光區，(2)400～760nm的可見光區，(3)2.5～25μm（按波數計為4000cm<-1>～400cm<-1>）的紅外光區。所（suǒ）用儀器為紫外分光光度計、可見光分光光度計（或比（bǐ）色（sè）計）、紅外分光光度計或原子吸收分光光度計（jì）。為保（bǎo）證測量的精密度（dù）和準確度，所有儀器應按（àn）照國家計（jì）量檢定規程或本附錄規定，定期進行（háng）校正檢定。

儀器組成

        分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規（guī）儀器（qì）。常用於核酸，蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。

       儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲係統組成

 光譜範圍

       包括波長範圍為400~760 nm的可見光區和波長範圍為200～400 nm的紫外光區.不同的（de）光源都有其特有的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀（yí）器的光源.

       鎢燈的發射光譜:鎢燈光源所發（fā）出的400～760nm波長的光譜光（guāng）通過三棱鏡折射（shè）後,可得（dé）到由紅橙（chéng）,黃綠,藍靛,紫組成的連續（xù）色譜;該色譜可作為可見光分光（guāng）光度計的光源.

       氫燈（或氘燈）的發射光（guāng）譜:氫燈能發出185～400 nm波（bō）長的光譜可作（zuò）為（wéi）紫外光光度（dù）計的光源.

物質的（de）吸收光譜(1)

    　　如果（guǒ）在光源和（hé）棱鏡之（zhī）間放（fàng）上某種物質的溶液,此時（shí）在屏上所（suǒ）顯示的光譜已不再是光源的光譜,它出現了幾條暗（àn）線,即光源發射光譜中某些波長的光因溶液吸收而消失,這種被溶液吸收（shōu）後的光譜稱為該溶（róng）液的吸收光譜.

       不同物質的（de）吸收光譜是不同的.因此根據（jù）吸收光譜,可以鑒別溶液中所（suǒ）含的物質.

物質的吸收（shōu）光譜(2)

       當光線通過某種物質的溶（róng）液時（shí）透過的光的強度減弱.因為有一部分光在溶液（yè）的（de）表麵反射或分（fèn）散,一部分光被組成此溶液的物質所吸收隻有（yǒu）一部分光可透過溶（róng）液.

    　　入射光= 反射光 + 分散光 + 吸收光（guāng） + 透過光

       如果我們（men）用蒸餾（liú）水(或組成此溶液的溶劑)作為"空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的損失則:

    　　入射光（guāng） = 吸收光 十 透（tòu）過光